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目的 觀察并分析泛素編輯蛋白A20對呼吸機相關性肺炎(VAP)患者單核細胞活性的影響。 方法 入選2019年2月至9月在鄭州大學第一附屬醫院診斷為VAP的患者24例(VAP組)和健康對照12例(對照組)。分離VAP組外周血單個核細胞(PBMCs)、感染部位和非感染部位的支氣管肺泡灌洗液(BALF)及對照組PBMCs,檢測CD14+單核細胞中A20水平。純化VAP患者CD14+單核細胞和CD4+T細胞,使用A20 siRNA轉染CD14+單核細胞。轉染的CD14+單核細胞與自體CD4+T細胞直接/間接接觸共培養,檢測CD4+T細胞分泌干擾素-γ(IFN-γ)和白細胞介素-17(IL-17)水平。轉染的CD14+單核與NCI-H889細胞直接/間接共培養,檢測細胞毒性、分泌細胞因子、顆粒酶B水平及腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體(TRAIL)、FasL配體(FasL)水平。組間比較采用t檢驗或SNK-q檢驗。 結果 VAP組外周血CD14+A20+細胞比例高于對照組(62.61±15.33%比47.13±11.82,P<0.05),A20平均熒光強度(MFI)亦高于對照組(227.9±64.18比178.2±58.62,P<0.05)。VAP組感染部位BALF中的CD14+A20+細胞比例高于未感染部位(66.14±19.62%比52.52±13.71%,P<0.05),A20 MFI亦高于未感染部位(268.0±72.56比197.4±60.01,P<0.05)。A20 siRNA轉染的VAP患者外周血和BALF中的CD14+單核細胞與自體CD4+T細胞直接接觸共培養后,CD4+T細胞分泌IFN-γ和IL-17的細胞比例均高于未轉染和siRNA轉染(P<0.05),但間接接觸共培養中,CD4+IFN-γ+和CD4+IL-17+細胞比例在未轉染、對照siRNA轉染和A20 siRNA轉染中的差異無統計學意義(P>0.05)。A20 siRNA轉染的VAP患者外周血和BALF中的CD14+單核細胞與NCI-H889細胞直接/間接接觸共培養后,靶細胞死亡比例均高于未轉染和siRNA轉染(P<0.05),腫瘤壞死因子-α、IL-6、顆粒酶B水平及TRAIL MFI亦高于未轉染和siRNA轉染(P<0.05),但靶細胞死亡比例在直接接觸和間接接觸共培養之間的差異無統計學意義(P>0.05)。 結論 VAP患者單核細胞中A20水平升高,可能發揮抑制單核細胞活性的作用。
王紅民,葉立群,楊寧寧,張小紅,趙順鑫. 泛素編輯蛋白A20對呼吸機相關性肺炎患者單核細胞活性的影響[J]. 中華急診醫學雜志, 2021,30(4): 414-421.